總膽*素（TBIL）含量檢測試劑盒說明書

                                            微量法

貨號：BC5185

規(guī)格：100T/96S

產品內容：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

產品說明：

總膽*素（Total bilirubin，TBil）是直接膽*素和間接膽*素的總和。血清總膽*素的測定是肝、膽功能檢查中的一項重要檢測項目。能準確地反映黃疸的程度，對臨床診斷隱性黃疸有重要意義。在表面活性劑的存在下，總膽*素能被亞*鈉氧化，生成膽綠素。通過檢測450nm下波長變化，可計算出總膽*素的含量。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、低溫離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

血清、血漿等液體樣本：直接測定。若有渾濁可以離心后取上清進行測定。

二、測定步驟

1、 分光光度計/酶標儀預熱30min以上，調節(jié)波長至450nm，分光光度計蒸餾水調零。

2、 按下表步驟加樣（在EP管或者96孔板上加入下列試劑）：

三、TBIL含量計算

1、 計算公式

（1）使用96孔板：

TBIL含量（μmol/L）=874.67×（ΔA測定-ΔA空白）+10.699

   （2）使用微量比色皿：

TBIL含量（μmol/L）=491.98×（ΔA測定-ΔA空白）+18.478

注意事項：

1、膽*見光易分解，測定時要盡量避光。

2、控制ΔA測定在0.01-1.5之間，如果低于或者超過可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。

實驗實例：

1、 取非正常小鼠血清按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A1測定-A2測定=0.271-0.148=0.13，ΔA空白=A1空白-A2空白=0.051-0.048=0.003，計算含量得：

TBIL（μmol/L）= 874.67×（ΔA測定-ΔA空白）+10.699=121.78 μmol/L。

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