直接膽*素（DBIL）含量檢測試劑盒說明書

                                            微量法

貨號：BC5175

規(guī)格：100T/96S

產品內容：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

產品說明：

直接膽*素（Direct bilirubin，DBil）又稱結合膽*，是由間接膽紅*進入肝后受肝內葡萄糖醛酸基轉移酶的作用與葡萄糖醛酸結合生成的。直接膽*素增高對臨床診斷阻塞性黃疸、肝細胞性黃疸、肝癌、胰頭癌、膽石癥、膽管癌等有重要意義。直接膽*素能被亞*鈉氧化，生成膽綠素。通過檢測450nm下波長變化，可計算出直接膽*素的含量。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、低溫離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

血清、血漿等液體樣本：直接測定。若溶液渾濁，可以離心后取上清進行測定。

二、測定步驟

1、 分光光度計/酶標儀預熱30min以上，調節(jié)波長至450nm，分光光度計用蒸餾水調零。

2、 按下表步驟加樣：（96孔板或者EP管中加入下列試劑）

三、DBIL含量計算

1、 計算公式

（1）使用96孔板：

DBIL含量（μmol/L）=1495.7×（ΔA測定-ΔA空白）-15.343

（2）使用微量比色皿：

DBIL含量（μmol/L）=1099.7×（ΔA測定-ΔA空白）-10.73

注意事項：

1、膽*素見光易分解，測定時要盡量避光。

2、如果ΔA＜0或過低，建議增加樣本量后再進行測定；如果ΔA＞0.5，建議稀釋樣本后再進行測定。

實驗實例：

1、 取非正常小鼠血清按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A1測定-A2測定=0.217-0.170=0.047，ΔA空白=A1空白-A2空白=0.044-0.044=0，計算含量得：

DBIL（μmol/L）= 1495.7×（ΔA測定-ΔA空白）-15.343=54.95 μmol/L。

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