直接膽*素（DBIL）含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法 
貨號：BC5170
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

產(chǎn)品說明：
直接膽*素（Direct bilirubin，DBil）又稱結合膽*素，是由間接膽*素進入肝后受肝內(nèi)葡萄糖醛酸基轉移酶的作用與葡萄糖醛酸結合生成的。直接膽*素增高對臨床診斷阻塞性黃疸、肝細胞性黃疸、肝癌、胰頭癌、膽石癥、膽管癌等有重要意義。直接膽*素能被氧化，生成膽綠素。通過檢測450nm下波長變化，可計算出直接膽*素的含量。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、低溫離心機、超聲波細胞破碎儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
血清、血漿等液體樣本：直接測定。若有渾濁可離心后取上清進行測定。
二、測定步驟

1. 分光光度計預熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至450nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 按下表步驟加樣（在EP管中加入下列試劑）：

三、DBIL含量計算

1. 計算公式

DBIL含量（μmol/L）=1099.7×（ΔA測定-ΔA空白）-10.73
注意事項：

1. 膽*素見光易分解，測定時要盡量避光。

2. 如果ΔA＜0或過低，建議增加樣本量后再進行測定；如果ΔA＞0.5，建議稀釋樣本后再進行測定。

實驗實例：

1. 取非正常小鼠血清按照測定步驟操作，用1mL玻璃比色皿測得計算ΔA測定=A1測定-A2測定=0.236-0.169= 0.067，ΔA空白=A1空白-A2空白=0.006-0.004=0.002，計算含量得：DBIL（μmol/L）= 1099.7×（ΔA測定-ΔA空白）-10.73=60.75 μmol/L。

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