土壤酸性蛋白酶活
性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC0865
規(guī)格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前加入10 mL試劑六，沸水浴攪拌溶解后待用，用不完的試劑2-8℃保存1個月；

2. 標準品：20μmol/mL 酪*酸溶液。

產品說明：
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化，其水解產物是高等植物的氮源之一。土壤酸性蛋白酶在酸性環(huán)境下催化蛋白質水解，與土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關。酸性條件下，土壤酸性蛋白酶可將酪蛋白水解產生酪*酸；在堿性條件下，酪*酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍，在680nm有特征吸收峰。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調式移液槍、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、研缽、蒸餾水、30-50目篩。

操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件

注意事項：
當吸光值大于1.5時，建議將上清液用蒸餾水稀釋后進行測定，計算時注意乘以稀釋倍數。
實驗實例：

1. 分別稱取2份0.05g土樣于1.5mLEP管中，分別為對照管及測定管。按照測定步驟操作，用96孔板測定吸光值，計算ΔA測定= A測定管-A對照管=0.189-0.178=0.016，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.374-0.045=0.329，按土壤質量計算酶活得：

土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)= 0.05×ΔA測定÷ΔA標準÷W= 0.05×0.016÷0.329÷0.05= 0.0486 U/g土樣。

1. 分別稱取2份0.05g森林土于1.5mLEP管中，分別為對照管及測定管。按照測定步驟操作，用96孔板測定吸光值，計算ΔA測定= A測定管-A對照管=0.831-0.612=0.219，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.374-0.045=0.329，按土壤質量計算酶活得：

土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)= 0.05×ΔA測定÷ΔA標準÷W= 0.05×0.219÷0.329÷0.05= 0.6657 U/g土樣。
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