品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | CAS | 詳詢 |
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分子式 | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
分子量 | 詳詢 | 貨號 | BC2525 |
規(guī)格 | 100T/96S | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | 測定意義:山*醇廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,不僅是糖運輸形式之一, | 應用領域 | 環(huán)保,化工,生物產業(yè),農業(yè),綜合 |
山*醇含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號:BC2525
規(guī)格:100T/96S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品 | 粉劑10 mg×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、標準品:臨用前將標準品用1mL蒸餾水溶解,配制成濃度為10 mg/mL的標準液待用,2-8℃可保存2周。
產品說明:
山*醇廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,不僅是糖運輸形式之一,而且與生物抗逆性和食物風味密切相關。因此,在糖代謝、抗逆性和食品研究中經常需要檢測山*醇含量變化。
山*醇在堿性溶液中與銅離子形成藍色絡合物,在655nm波長有特征吸收峰。
技術指標:
低檢出限:0.0583 mg/mL
線性范圍:0.125-4 mg/mL
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產品資料"附件
一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
稱取約0.1g樣本,加入1mL蒸餾水研磨成勻漿,置沸水浴中煮沸10分鐘(蓋緊,以防止水分散失),冷卻至室溫后,8000g,常溫離心10min,取上清液待測。
二、測定步驟
分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至655nm,分光光度計用蒸餾水調零。
標準溶液的制備:臨用前將10mg/mL標準液用蒸餾水稀釋至4、2、1、0.5、0.25、0.125、0(空白管)mg/mL標準溶液待測。
標準液稀釋可參考下表。
序號 | 稀釋前濃度(mg/mL) | 標準液體積(µL) | 蒸餾水體積(µL) | 稀釋后濃度(mg/mL) |
1 | 10 | 400 | 600 | 4 |
2 | 4 | 500 | 500 | 2 |
3 | 2 | 500 | 500 | 1 |
4 | 1 | 500 | 500 | 0.5 |
5 | 0.5 | 500 | 500 | 0.25 |
6 | 0.25 | 500 | 500 | 0.125 |
7 | 0 | 0 | 500 | 0(空白管) |
備注:實驗中每個標準管需230µL標準溶液。
樣本測定(在1.5mL EP管中依次加入下列試劑):
試劑(μL) | 標準管 | 測定管 |
試劑一 | 35 | 35 |
試劑二 | 35 | 35 |
樣本 | - | 230 |
標準液 | 230 | - |
渦旋混勻,室溫靜置15min,8000g,常溫離心10min,取200μL上清液至微量玻璃比色皿或96孔板中,測655nm下吸光值A,分別記為A標準、A測定、A空白。ΔA測定=A測定-A空白,ΔA標準=A標準-A空白。標準曲線和空白管只需測1-2次。 |
注意事項:
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。計算公式中注意乘以稀釋倍數。
參考文獻:
Salvucci M E, Stecher D S, Henneberry T J. Heat shock proteins in whiteflies, an insect that accumulates sorbitol in response to heat stress[J]. Journal of Thermal Biology, 2000, 25(5): 363-371.
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